立體定位儀對于小動物的腦立體定位來說,是一種可靠的,多功能的設備。通過儀器的精確定位,可以確保電極、微管以及其它設備在實驗過程中的精確定位。其是利用大小鼠顱骨外面的前囟點,即Bragma點,或其它參考點所規(guī)定的三維坐標系統(tǒng),來確定皮層下某些神經(jīng)結(jié)構(gòu)的位置,通過固定在立體定位儀操作臂上的顱鉆在特定三維坐標的神經(jīng)結(jié)構(gòu)的位置,鉆孔打開顱骨,以便在非直視暴露下對其進行定向的刺激、破壞、注射藥物、引導電位等研究。儀器的操作及維護需要相互配合,都要重視,下面我們來仔細說說。
一、使用步驟:
1. 固定上頜:擰松上頜固定裝置的旋鈕,向上移動使其在0上5mm,再旋緊旋鈕。
2. 插入耳桿:動物麻醉后,將耳桿緊貼雙耳分別插入兩外耳道;然后將耳桿固定在主框上,并使兩個耳桿的讀數(shù)相同。
3. 固定上頜:調(diào)節(jié)“壓環(huán)旋鈕”使壓環(huán)上移,將動物的上門齒鉤住門齒板的前桿,使門齒根部緊靠桿的上緣;旋松調(diào)節(jié)槽上“固定旋鈕”,在主框上前后移動至頭自然伸展、然后固定;下移“壓環(huán)旋鈕”,夾緊頭部。
二、日常維護:
1.輕拿輕放,避免儀器碰撞而受損
2.選擇實驗對象不要超過儀器的適用范圍
3.實驗結(jié)束后要及時清理儀器,保證其精確性
三、實驗過程:
1、先參照大鼠腦立體定位圖譜或者文獻確定腦內(nèi)注射部位的坐標,包括前囟前或后多少mm,中線左或右多少mm,顱骨下深度為多少mm。
2、麻醉大鼠,然后固定在立體定位儀上,主要是固定鼻端和兩耳部位,固定后大鼠的頭部是不能動的。
3、剪去大鼠頭頂部毛,皮膚表面消毒,然后根據(jù)需要縱向或者橫向剪開皮膚,用棉球和眼科剪刀除去顱骨表面的腦膜,過一會顱骨干燥后找到前囟部位(靠前部的十字交叉點),以前囟部位為原點,參考定位坐標把注射針移動到注射部位的上方,
4、在顱骨相應的位置用簽字筆點一個原點,移開注射針,用牙科轉(zhuǎn)在注射部位轉(zhuǎn)一個小孔,如果出血的話及時止血,再把注射針移回注射部位上方,吸入注射藥物,然后再參照定位注射坐標把注射針移動到注射部位,開始緩慢注入藥物,注射后留針一會,再緩慢把注射針移出腦內(nèi),縫合皮膚,肌肉注射青霉素抗感染,把動物放回飼養(yǎng)籠內(nèi),術后注意保溫。